人原钙黏素1(PCDH1)ELISA试剂盒 
实验原理:

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测人原钙黏素1（PCDH1）蛋白浓度。

‌检测范围与灵敏度‌：

检测范围：0.313–20 ng/mL

灵敏度：可达0.188 ng/mL或更高（以pg/mL为单位的检测亦有报道）。

‌精密度表现‌：批内变异系数（CV）<8%，批间CV<10%，确保数据重复性和可靠性。

‌标准曲线相关性‌：R值≥0.9900，表明线性拟合良好。

实验步骤如下：

‌一、包被抗体固定‌：抗PCDH1单克隆抗体预包被于微孔板，形成固相抗体层。

‌二、抗原结合‌：样本中的PCDH1与固相抗体结合，形成“固相抗体-抗原”复合物。

三、酶标抗体反应‌：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，与抗原结合形成“抗体-抗原-酶标抗体”
复合物。

‌四、显色与测定‌：加入TMB底物溶液，HRP催化显色反应，生成蓝色产物；加入终止液后变为黄色，颜色深
浅与样本中PCDH1浓度成正比。使用酶标仪在450nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本浓
度。

适用样本类型‌：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝）、细胞上清液、组织匀浆等。

注意事项:

‌
保存条件‌：2–8℃避光冷藏，不可冷冻，运输时采用泡沫盒加冰袋冷链配送。

‌有效期‌：通常为6个月，建议使用当月批次以保证活性。

‌样本处理‌：

血清：采集后3000转/分离心10分钟，分离血清；

血浆：推荐EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000转/分离心30分钟取上清；

组织匀浆：加入生理盐水匀浆后，3000转/分离心10分钟取上清。

‌冻存要求‌：若样本不立即检测，应分装后冻存于-20℃，避免反复冻融。

‌操作提示‌：

浓缩洗涤液使用前需水浴加热溶解结晶；

所有液体组分使用前充分摇匀；

不同批次试剂不可混用，防止交叉干扰。
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操作步骤:

‌1、标准品稀释‌：按说明书梯度稀释标准品，设置标准孔和样本孔。

2‌、加样‌：

样本孔：先加40μL样品稀释液，再加10μL待测样本（稀释度5倍）。

空白孔：不加样本及酶标试剂。

加样时避免触及孔壁，轻轻混匀。

3‌、温育‌：每孔加入100μL酶标试剂（空白孔除外），封板膜密封，37℃孵育60分钟。

‌4、洗涤‌：揭掉封板膜，弃去液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复5次，拍干。

‌5、显色‌：每孔加入50μL底物TMB溶液，37℃避光显色15分钟。

‌6、终止与测定‌：每孔加入50μL终止液，15分钟内于450nm测定OD值。