特性：

C127(乳腺肿瘤细胞)安全性：所有肿瘤和病转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。

特性：

安全性：所有肿瘤和病转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。

细胞特性：

1)组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。

注意事项：

1、观察细胞zui好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们。

ZDHHC5 ELISA KitRat TLR4(Toll-like receptor 4) ELISA Kit油酰氯细胞白细胞介素-1β转换酶（ICE）活性荧光淬灭法定量检测试剂盒

ZC3H4 ELISA KitRat Xdh(Xanthine dehydrogenase/oxidase) ELISA Kit油酰氯组织白细胞介素-1β转换酶（ICE）活性荧光淬灭法定量检测试剂盒

ZDHHC9 ELISA KitRat Lipc(Hepatic triacylglycerol lipase) ELISA Kit油酰氯细胞血管紧张素Ⅰ转化酶（ACE）总活性比色法定量检测试剂盒

ZDHHC7 ELISA KitRat Pdha1(Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, somatic form, mitochondrial) ELISA Kit油酰氯组织血管紧张素Ⅰ转化酶（ACE）总活性比色法定量检测试剂盒

ZBP1 ELISA KitRat Hcrt(Orexin) ELISA Kit苔黑酚一水合物血液血管紧张素Ⅰ转化酶（ACE）总活性比色法定量检测试剂盒

ZBTB11 ELISA KitRat Agt(Angiotensinogen) ELISA Kit苔黑酚一水合物体液血管紧张素Ⅰ转化酶（ACE）总活性比色法定量检测试剂盒

ZBTB25 ELISA KitRat Cck(Cholecystokinin) ELISA Kit苔黑酚一水合物细胞血管紧张素Ⅰ转化酶（ACE）总活性荧光定量检测试剂盒

YPEL5 ELISA KitRat Iapp(Islet amyloid polypeptide) ELISA Kit邻氯苯甲醛组织血管紧张素Ⅰ转化酶（ACE）总活性荧光定量检测试剂盒

NKTR ELISA KitTHSD1  血小板跨膜反应蛋白1抗体三硝基甲苯盐酸可乐定进口/国产RASSF3  Ras相关区域家族1A抗体含量：含量测定

NKRF ELISA KitVG5Q/AGGF1  血管生长因子VG5Q抗体四氢芳樟醇盐酸克仑特罗进口/国产NPR2L/G21 protein  G21蛋白质抗体含量：含量测定

PTHLH(PaRathyroid hormone-related protein) ELISA Kitstabilin1/STAB 1  淋巴管内皮细胞和血管内皮细胞受体1抗体四氢芳樟醇盐酸芬拉明进口/国产XAB2/SYF1  XAB2蛋白抗体含量：含量测定

NLRX1 ELISA KitUTS2D  尾加压素2相关肽抗体四乙基硫酸氢铵叶酸进口/国产PDGFRL  血小板源性生长因子受体β样蛋白抗体含量：HPLC法含量测定

NLRP2 ELISA KitHyp/hydroxyproline  羟脯氨酸抗体硼酸三丁酯荧光母进口/国产PDSS2  抑癌蛋白DLP1抗体含量：检查

NMD3 ELISA KitBAI1  脑特异性血管生成抑制蛋白1抗体三甲基碘化亚砜左炔诺孕进口/国产PHAP1  蛋白酸酶2A抑制剂1抗体含量：HPLC法含量测定用

NFIL3 ELISA KitBAI2/Brain Specific Angiogenesis Inhibitor 2  脑特异性血管生成抑制蛋白2抗体三甲基碘化亚砜胆红进口/国产POU6F2  转录因子RPF1抗体含量：含量测定

HSPD1/HSP-60(60 kDa heat shock protein, mitochondrial) ELISA KitKLHL20  Kelch样蛋白20抗体(四氢-2H-吡喃-4-基)甲醇胆酸进口/国产PRKCDBP  蛋白激酶C delta结合蛋白抗体含量：含量测定

实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。