小鼠β淀粉样蛋白1-42elisa检测试剂盒常见组成部分:
1)酶和底物:在ELISA中zui常用的酶为HRP和ALP。
2)抗体:在ELISA中应用的抗体可分为多克隆抗体(多抗)和单克隆抗体(单抗)。
3)抗原:在ELISA中应用的抗原要求有较高的特异性、亲和力和纯度。主要有三类,即自然抗原、人工合成抗原和基因重组抗原。
4 人E选择素(E-Selectin/CD62E)检测试剂盒包被:将免疫活性物质(抗原或抗体)结合于固相载体上的过程称为包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纤维薄膜等;常用的方法有吸附法、化学交联法及亲和素-生物素间接包被法
5)固相载体:固相载体是ELISA中用以分离结合标记物和游离标记物的主要手段,应与各种免疫活性物质有良好的结合性能并且不改变其免疫活性。常用的固相载体有聚苯乙烯塑料和硝酸纤维素膜。
【实验用途】Aβ1-42,Aβ 主要包括Aβ 40 和Aβ 42,其中Aβ 42 更容易聚合,也更具有致病性。Aβ 的产生需要有β- 和γ- 分泌酶的活性存在。APP 的胞外区首先被β- 分泌酶在Aβ 的1 或11 氨基酸位置水解,所产生的跨膜片段APP βCTF 再进一步被γ- 分泌酶在膜双分子层内Aβ 的40 或42位置水解,从而生成Aβ40 或Aβ42。决定Aβ 产生的γ- 分泌酶是一个高分子量的复合体。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂(ELISA)。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体,经生物素(biotin)标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。