人总胆固醇ELISA血清样本处理的核心是守住采血、分离、保存、干扰排除四道防线，可避免90%以上的结果偏差。

采血前前置准备

从源头减少样本本身的基础误差：

采血前严格空腹12小时，前2周保持日常饮食习惯，24小时内不饮酒、不做剧烈运动。

采血前静坐15分钟，止血带使用时间绝对不超过1分钟，避免局部血液浓缩导致结果偏高。

无法停药的血脂影响类药物，需在样本信息中明确标注用药情况，便于后续结果校正参考。

样本分离规范

直接保障总胆固醇的结构和浓度稳定：

血清样本室温放置2小时或4℃过夜充分凝固后，1000×g离心20分钟取上清；血浆样本采集后30分钟内完成离心分离。

离心后彻底去除纤维蛋白沉淀，避免后续加样时堵孔、引发非特异性吸附。

‌中重度溶血样本直接弃用‌，红细胞释放的过氧化物酶会直接催化TMB显色，造成假阳性结果。

样本冻存与转运

避免胆固醇结构破坏引发结果失真：

样本按单次检测用量分装，4℃可短期保存5天，长期检测置于-20℃或-80℃冻存。

‌冻融次数严格控制≤2次‌，反复冻融会破坏脂蛋白结构，导致总胆固醇结果偏低。

转运过程避免剧烈震荡和温度大幅波动，全程保持2-8℃冷链条件。

操作与干扰排除

针对性消除人血清基质带来的专属误差：

样本中绝对不能加入叠氮钠，它会完全抑制HRP酶活性，直接造成假阴性结果。

浑浊脂血样本检测前需再次5000×g离心5分钟，彻底去除底部沉淀后再上机。

高异嗜性抗体、因子阳性的血清样本，提前加入专用阻断剂预孵育15分钟，消除非特异性桥连干扰。